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沃特世HPLC液相色譜的分離過(guò)程你知道嗎?

更新時(shí)間:2020-06-27      點(diǎn)擊次數(shù):1552
   沃特世HPLC液相色譜的分離過(guò)程:
  同其他色譜過(guò)程一樣,HPLC也是溶質(zhì)在固定相和流動(dòng)相之間進(jìn)行的一種連續(xù)多次交換過(guò)程。它借溶質(zhì)在兩相間分配系數(shù)、親和力、吸附力或分子大小不同而引起的排阻作用的差別使不同溶質(zhì)得以分離。
  沃特世HPLC液相色譜開始樣品加在柱頭上,假設(shè)樣品中含有3個(gè)組分,A、B和C,隨流動(dòng)相一起進(jìn)入色譜柱,開始在固定相和流動(dòng)相之間進(jìn)行分配。分配系數(shù)小的組分A不易被固定相阻留,較早地流出色譜柱。分配系數(shù)大的組分C在固定相上滯留時(shí)間長(zhǎng),較晚流出色譜柱。組分B的分配系數(shù)介于A,C之間,第二個(gè)流出色譜柱。若一個(gè)含有多個(gè)組分的混合物進(jìn)入系統(tǒng),則混合物中各組分按其在兩相間分配系數(shù)的不同先后流出色譜柱,達(dá)到分離之目的。
 

沃特世HPLC液相色譜

  不同組分在色譜過(guò)程中的分離情況,取決于各組分在兩相間的分配系數(shù)、吸附能力、親和力等是否有差異,這是熱力學(xué)平衡問(wèn)題,也是分離的首要條件。
  其次,沃特世HPLC液相色譜當(dāng)不同組分在色譜柱中運(yùn)動(dòng)時(shí),譜帶隨柱長(zhǎng)展寬,分離情況與兩相之間的擴(kuò)散系數(shù)、固定相粒度的大小、柱的填充情況以及流動(dòng)相的流速等有關(guān)。所以分離終效果則是熱力學(xué)與動(dòng)力學(xué)兩方面的綜合效益。
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